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过氧化氢(Hydrogen peroxide, H2O2)特异性荧光探针专题
>###nbsp;    作者:ag九游会原创     文章泉源:ag九游会生物    

Detection and measurement of hydrogen peroxide:

过氧化氢(Hydrogen peroxide, H2O2)特异性荧光探针专题

 

专题要害词:

ROSGreenTM H2O2 Probe;BES-H2O2-Ac;hydrogen peroxide (H2O2) 过氧化氢;HYDROP-EX;Amplex Red reagent;Peroxidase 过氧化物酶;

 

专题配景:

活性氧(ROS)好比超氧阴离子(O2-.),过氧化氢(H2O2)和羟基自在基(HO .)是种种疾病病剃头展中的紧张调治剂。DCFH和DCFH-DA广泛用作荧光探针测定细胞泉源的过氧化氢(H2O2),但这些化合物最大的缺陷在于对H2O2的选择性极端弱。

为此,许多公司开辟特异性的过氧化氢(H2O2)探针,以分析H2O2招致疾病相干的细胞反响和动力学功效。

 

一、高选择性过氧化氢探针(BES-H2O2-Ac,BES-H2O2,from wako chemical)

Wako chemical公司开辟两款BES-H2O2,辨别检测细胞泉源的H2O2和细胞非浸透性的H2O2,具高选择性。

1)两款探针作用机理如下:


2)两款探针的使用示例:

图:BES-H2O2检测Jurkat T细胞的荧光成像和统一视野下的相位比拟成像图。Jurkat T细胞用含50µM BES-H2O2-Ac的培育基孵育1h。之后,此中一组细胞用含5mM 丁酸(H2O2发生的安慰物)的培育基处置,而另一组用正常培育基(不含H2O2发生的安慰物)处置,辨别培育1h。(图片泉源: Professor Hatsuo Maeda, PhD., School of Pharmacy, Hyogo Univ. of Health Sciences)。


3)两款探针的订购信息:接待来电征询021-54736159,或QQ:2971634497,1563822900。

货号

称号

规格             

代价(元)  

###nbsp;   

BES H2O2-Ac (cell-permeant),Ex/Em=485/515nm      

1mg

征询

024-18751

BES-H2O2 (Cell-impermeant),Ex/Em=485/515nm

1mg

征询

产品上风:

□     高度选择性联合H2O2;

□     BES H2O2-Ac具细胞膜浸透性;

□     检测细胞泉源的H2O2;

□     实用于荧光成像;

 

二、高选择性过氧化氢探针(ROSGreenTMH2O2 Probe过氧化氢荧光探针,from MKBio)

ag九游会生物(MKBio)开辟一款细胞膜浸透性的过氧化氢特异性探针:ROSGreenTMH2O2 Probe。

1)  探针形貌

过氧化氢(Hydrogen peroxide, H2O2)是一种反应氧代谢副产品,用于很多氧化应激相干态的要害调治剂,到场人体少量的心理和病理运动,好比哮喘、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、神经性阑珊疾病和唐氏综合征等,但现在对H2O2天生、积聚、运输和功效的分子机制仍理解很少,最大的限定在于缺乏敏捷且特异性H2O2探针,用于活细胞研讨。现在能失掉的H2O2反响性探针的缺陷包罗1)来自其他ROS好比过氧亚硝基阴离子(ONOO-)、过氧化基(ROO•)、超氧化物(•O2–)的配景荧光搅扰;2)对外源活化酶的需求;水缺乏水溶性或不兼容于水溶系统;4)以及紫外地区的引发光谱特性等。


ROSGreenTMH2O2Probe正是克制以上缺陷开辟的一款过氧化氢(H2O2)选择性探针。探针自己无荧光,可见光地区内无吸取峰。一旦打仗H2O2,刹时引发荧光增长并陪同可见波长吸取带的天生(Ex/Em= 490/514nm)。因其二元的吸取/发射荧光反响,此探针具有较大的动力学范畴。与类似的ROS好比O2–,NO,或OCl-相比,ROSGreenTMH2O2Probe对H2O2出现出>100倍(100-fold)的选择性。


2)  使用示例

 

图. Costar 玄色96孔培育板内CHO-K1活细胞用ROSGreenTMH2O2Probe的染色图。图A:比较细胞;图B:用H2O2(100μM)处置5min后的细胞;


3)订购信息:接待来电征询021-54736159,或QQ:2971634497,1563822900。

货号

称号

规格            

代价(元)  

MX5202-1MG     

ROSGreenTM H2O2 Probe 过氧化氢荧光探针     

1mg

1580

产品上风:

□     高度选择性联合H2O2;

□     ROSGreenTMH2O2 Probe具细胞膜浸透性;

□     检测溶液或细胞泉源的H2O2;

□     实用于荧光成像和流式细胞剖析;

 

三、选择性过氧化氢探针(ADHP,Amplex®Red过氧化氢探针,from MKBio)

ag九游会生物(MKBio)供给的10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP),中文名10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪,以牌号名Amplex®Red在市场上贩卖,是现在为止最敏捷和波动的荧光探针用来检测HRP和H2O2。

1)  根本形貌

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP),中文名10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪,以牌号名Amplex®Red在市场上贩卖。ADHP是一种高度敏捷和波动的过氧化物酶底物,选择性检测过氧化氢(H2O2)。存在辣根过氧化物酶(HRP)的系统中,这一根本无色和非荧光的ADHP与H2O2以1:1的化学定量比反响,天生强白色荧光的试卤灵(Resorufin),可经过荧光光度计和酶标仪剖析后果。很多酶反响能发生H2O2,因而,ADHP可以用在偶联酶促反响中检测很多差别酶的生物活性。


2)  事情原理

图. 利用ADHP举行偶联酶促反响的事情原理。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化天生过氧化氢(H2O2),经过辣根过氧化物酶(HRP)催化ADHP反响天生强荧光试卤灵(Resorufin)。


3)  罕见使用

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP)是现在为止最敏捷和波动的荧光探针用来检测HRP和H2O2。

A)  ADHP广泛用来检测很多免疫实行中的HRP;

B)  ADHP用来检测微量的H2O2;

Zhou, M.等研讨标明ADHP(Amplex®Red)检测过氧化物酶活性,最少能检测1×10−5U/mL HRP;或H2O2,最少能检测50nM H2O2。【文献泉源:Zhou M et al. A stable nonfluorescent derivative of resorufin for the fluorometric determination of trace hydrogen peroxide: applications in detecting the activity of phagocyte NADPH oxidase and other oxidases. Anal Biochem. 1997 Nov 15;253(2):162-8.】


4)  订购信息:接待来电征询021-54736159,或QQ:2971634497,1563822900。

货号

产品称号

规格           

代价(元)  

MX5203-1MG      

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针   

1mg

339

MX5203-5MG

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针

5mg

1429

MX5203-25MG

10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针

25mg

4489

 

四、过氧化氢扫除剂(Hydrogen Peroxide Scavenger from MKBio)

货号

产品称号

规格          

代价(元) 

MP0921-1G

Catalase from bovine liver, 2000-5000 units/mg protein      

1g

240

MP0921-5G

Catalase from bovine liver, 2000-5000 units/mg protein 

5g

800

MX4809-5MG

EUK-134 SOD/过氧化氢酶模仿物

5mg

528

MX4809-50MG      

EUK-134 SOD/过氧化氢酶模仿物

50mg

1798

MX4814-25G

N,N'-Dimethylthiourea (DMTU) N,N'-二甲基硫脲

25g

368

MX4814-100G

N,N'-Dimethylthiourea (DMTU) N,N'-二甲基硫脲

100g

948

 

五、过氧化氢活性检测试剂盒(Hydrogen Peroxide assay kit)

ag九游会生物作为AAT bioquest在中国的受权署理商,提供该品牌的优质过氧化氢活性检测试剂盒,比色法(Cat#: 11500)和荧光法(Cat#:11501),请依据实行详细需求以及现有检测仪器来选择符合产品。

货号

产品称号

规格

代价(元)    

11500    

Amplite™比色法氢过氧化物检测试剂盒Colorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit

500 Tests      

2940

11501

Amplite™荧光法氢过氧化物检测试剂盒*白色荧光* Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit   

500 Tests

2940


1)试剂盒特性(比色法,Colorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit)

测定工具:溶液和细胞裂解液

检测原理:利用Amplite™ IR过氧化物酶底物来定量检测溶液和细胞提取物内的过氧化氢程度。一旦过氧化氢氧化,无色的Amplite™ IR发生强蓝色产品,在pH 4-10范畴内不受pH影响。

测定仪器:吸光度测定酶标仪(650nm)

后果展示:


2) 试剂盒特性(荧光法,Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit)

测定工具:溶液和细胞裂解液

检测原理:利用Amplite™ red过氧化物酶底物来定量检测溶液和细胞提取物内的过氧化氢程度。

测定仪器:荧光酶标仪(540nm/590nm)

后果示例:

 


 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBioag九游会一切】


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